粮油检验花生中白藜芦醇的测定高效液相色谱法

粮油检验花生中白藜芦醇的测定高效液相色谱法

国家标准 GB/T24903一2010 粮油检验花生中白藜芦醇的测定 高效液相色谱法 Inspeetionfgrainamdols一Determimationfresveratrolinpeanutby highperformanceliquidchrommatography 2010-06-30发布 2011-01-01实施 国家质量监督检验检疫总局 发布 国家标准化管理委员会国家标准
GB/T24903一2010 前 言 本标准的附录A为资料性附录 本标准由国家粮食局提出 本标准由全国粮油标准化技术委员会归口 本标准起草单位;南京财经大学、江南大学 本标准主要起草人:汪海峰,袁建、杨晓蓉,张连富
GB/T24903一2010 粮油检验花生中白藜芦醇的测定 高效液相色谱法 范围 本标准规定了高效液相色谱法测定花生中白黎芦醇含量的原理、试剂和材料、仪器和设备、操作步 骤及结果计算 本标准适用于花生果,花生仁中白藜芦醇含量的测定 样品中白藜芦醇的检出限为0.1mg/kg 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款 凡是注日期的引用文件,其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本 凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 原理 试样中的白藜芦醇用乙醇-水溶液提取,提取液离心后,取上清液,用配有紫外检测器的高效液相色 谱仪进行测定,以外标法定量 试剂和材料 除另有规定外,所用试剂均为分析纯,实验用水应符合GB/T6682中二级要求 4.1无水乙醇 4.2甲醇;色谱纯 4.3乙晴;色谱纯 4.4冰醋酸 4.585%乙醇浴液;取850ml.乙醉(4.1),加150ml水,混匀 4.6液相流动相乙腊十水十冰醋酸=25十75十0.09 取250mL乙腊(4.3),加人750mL水和 0.9ml冰醋酸(4.4)混匀,通过0.2um的滤膜(5.6)并脱气 白黎芦醇标准品:纯度99% max(精确至0.0oo1p白黎芦醇标准品(4.),用甲剧 白黎芦醇标准储备溶液:准确称取12.5m mg/L白藜芦醇标准储备液,避光保存于4C冰箱备用 2)溶解并定容至250mL,得到50 白黎芦醇标准工作溶液;准确移取1mL,2mL、4mL.6mL,8mL,10mL白黎芦醇标准储备液 4.8),用甲醉(4.2)稀释并定容至50nl.,得到一系列的标准工作溶液(质量浓度分别为1mg/L. /L,8mg/L、10mg/L) 2mg/L、4mg/L,6 mg 仪器和设备 高效液相色谱仪,带紫外检渊群 5.1 5. 2 粉碎机:高速万能粉碎机,转速24000r/min,或相当的设备 3 5. 台式离心机:不低于5000r/min,或相当的设备
GB/T24903一2010 4 微量进样器:10AlL 5 5.5天平;感量0.01g,0.0001g 5.6滤膜;孔径0.2m,直径25mm的聚碱膜或相当者 操作步骤 6.1试样制备 花生果样品剥壳,花生仁样品直接取样 min3tmin 分取花生仁样品约100g,用粉碎机(5.2)粉碎2n 6.2提取 称取粉碎试样约5只(精确至0.o)于250nL具塞三角瓶中,加人60nl85%乙醉游被(4.5),置 于80C水浴中提取45min,不时振摇,冷却后用滤纸过滤,以少量85%乙醉溶液(4.5)洗涤残渣,过滤， mn,离心速度不低于500r/nn ,离心后 合并滤液,定容至100ml 移取1ml一2ml滤液,离心5 的上清液供进样测定 6.3测定 6.3.1高效液相色谱参考条件 色谐柱.C柱,150mm×3.9mm(内径),4m,或相当者 流动相:乙睛十水十冰醋酸(4.6) 流速:0.7mL/min 紫外检测器;波长306n nm 柱温:室温 进样量;10AL 白藜芦醉标准品及样品测定的色谱图参见附录A 6.3.2定量 用微量进样器(5.4)分别吸取等体积的白藜芦醇标准工作溶液和样品离心后的上清液进样分析,测 定响应值(峰高或峰面积),以标准工作液的浓度与相应的峰面积绘制标准曲线,以样液白藜芦醇的峰面 积查标准曲线,求得相应的白藜芦醇的浓度(e,). 结果计算 花生仁样品中白藜芦醇的含量按式(1)计算 ,×A×V X=" A ×n 式中: -样品中白藜芦醇的质量分数,单位为毫克每千克(mg/kg); 试样最终定容体积,单位为毫升(mL); A 样液中白藜芦醇的峰面积数值; -标准溶液中白黎芦醇的浓度,单位为毫克每升mg/L); 标准溶液中白藜芦醇的峰面积数值 -称取试样的质量,单位为克(g). nn 测定结果以花生仁中白藜芦醉含量计,保留至小数点后1位数字 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%
GB/T24903?2010 ?A ?? ???? ?????A.1?A.2 mV 40 30 20 10 min ?A.1?????? mV 20 15 10 min ?A.2??а????