苹果瘿蚊检疫鉴定方法

国家标准 GB/T33020一2016 苹果瘦蚊检疫鉴定方法 DetectionandidentificationofDasineuranaliKieffer 2016-10-13发布 2017-05-01实施 国家质量监督检验检疫总局 发布 国家标准化管理委员会国家标准
GB/T33020一2016 苹果瘦蚊检疫鉴定方法 范围 本标准规定了草果艘蚊的检测,饲养、标本制作和室内鉴定等方法 本标准适用于苹果壑蚊的检疫和鉴定 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件 2.1 体长bodylength 壑蚊成虫虫体头最前部到腹部末端的长度 2.2 翅长winglength 樱蚊成虫虫体从翅基到翅端的长度 2.3 翅端wingapex !蚊成虫翅的外缘离翅基最远端 结部node 壑蚊成虫触角鞭小结lagellomere)基部着生微刺的膨大部分,与其端部的细长的颈部(neck 相对 2.5 环丝circumfila 壑蚊科多数种类在双翅目中的特有结构,为成虫触角鞭小节结部上横向环绕并有纵向相连的带状 或环状结构,其两端均着生于结部,无游离端 雄虫通常比雌虫环丝发达 苹果瘦蚊基本信息 a.sineuramali(Kiefer,1904 学名:Das 英文名;appleleafcurlingmidge,appleleafmidge 中文名苹果樱蚊,或称苹果(叶)壑蚊 分类地位;苹果樱蚊属于双翅目Diptera，蚊科Cecidomyidae,叶蚊属也称达樱蚊属 DasineuraRondani 叶蚊属全世界已知466种(Gagne,2010),其中苹果樱蚊的重要近似种为梨叶楼 蚊DasineurayriBouche,1847) 传播途径苹果壑蚊主要以生活于寄主卷叶内的幼虫以及结茧于寄主植株附带土壤中的幼虫和蛹， 随寄主植物果实和植株进行远距离传播 苹果!蚊其他信息参见附录A
GB/T33020一2016 方法原理 根据苹果癌蚊危害状,在检疫现场肉眼观察寄主植物,取得幼虫、蛹或成虫,如取得幼虫和蛹需饲养 至成虫,解剖雌雄成虫并制成玻片标本,在显微镜下观察,根据形态特征对种类进行判定 器材和试剂 器材 5.1 显微镜、体视显微镜、干燥箱,解剖针,眼科毁.0号毛笔、解剖穴盘、表面皿,烧杯、载玻片,盖玻片、 吸管、医用纱布、橡皮筋、养虫瓶(500mL或1L)、生物培养箱、解剖刀、小剪刀、培养土、标签、封口塑 料袋 5.2试剂 75%乙醇溶液,95%乙醇溶液,无水乙醉溶液,10%氢氧化钠溶液,二甲苯,苯酚、冰乙酸、香柏油、中 性树胶(以上使用化学试剂均为分析纯) 检测与饲养 6.1检测 在检疫现场仔细观察寄主植物叶片,果实以及植株所带泥土上是否有幼虫或蝠,如发现有卷叶,则 用解剖刀和小勇刀把卷叶剖开查找,如发现幼虫或蛹,连同寄主植物一起装人可封口塑料袋 塑料袋加 标签和编号,记录时间,地点,寄主,采集人,虫源地等,带回实验室 6.2饲养 现场检查获得的幼虫或蛹需要进一步饲养至成虫再进行鉴定 将带有幼虫的寄主叶片或蛹放人养 虫瓶中,期内置放一个盛有培养土的表面皿供幼虫化蛹及羽化,然后将养虫瓶置于温度25C30C、 相对湿度50%一80%的生物培养箱内饲养 标本的制作准备 7.1 标本准备 饲养羽化后的或直接采集到的壑蚊成虫,用0号毛笔蘸取75%乙醇溶液将成虫移人75%乙醇溶液 中保存,以备制片 7.2雌雄成虫玻片标本 苹果樱蚊雌雄成虫玻片标本制作方法参见附录B 实验室鉴定 8.1瘦蚊科鉴定特征 mm5.00 成虫是微小至小型的蚊类昆虫,体长通常0.50 mm,触角通常较长,翅脉脉序简单,纵脉
GB/T33020一2016 不多于5条,胫距缺失 幼虫圆柱状或扁圆柱状,老熟幼虫前胸腹面具胸骨片 8.2叶瘦蚊属鉴定特征 下颗须4节;附节爪均具齿;R 脉在翅端稍前与C脉汇合;雄虫生殖节上的抱器基节中基瓣由基部 向端部渐细,并几乎与阳茎等长;雌虫产卵器可伸缩,且尾须融合;雌虫第8腹节背板明显长于第7腹节 背板.并且趋向于纵向延伸并左右分离 8.3苹果瘦蚊鉴定特征 8.3.1成虫 成虫鉴定特征如下(参见附录C): 体型体小型,体长;雄虫1.50mm2.00mm,雌虫1.70mm一2.30mm(正常体态,即非产卵 状态,产卵器不完全伸长);翅长;雄1.30mm~1.50mm,雌1.55mm~1.70mm; 体色;虫体深棕色,雌虫腹部呈淡红色或浅棕色; 下颗须;下颗须4十1节(包括负唇须节)(参见图c.1中A); 触角;2十12一13节,多为2十13节 触角单结型,雄虫触角颈部相对较长,雌虫颈部极短,环 丝带状贴生(参见图c.1中B,C) 脉在翅基部1/2靠前处与C脉汇合;R 翅:透明,密被毛和鳞片;R脉、C脉和R脉粗壮;R 脉在翅端稍靠前处与C脉汇合;M、脉微弱,在翅基部和翅缘处弱化近于消失;Cu脉分叉,呈 大约50"角;PCu脉与Cu脉几乎平行(参见图C.1中D); 咐节爪;各足酣节的爪均具基齿,爪缓慢弯曲,其基部具较小的三角状突出物,基齿约为爪长的 2/3,爪间突约与爪等长,爪垫细长棒状,约为爪长的1/2(参见图C.2中E); 雄虫生殖节;抱器基节较壮,近基部内侧具被短毛的中基瓣在一侧抱握阳茎;抱器端节粗壮,不 明显弯曲,近基部膨大,端部具单齿;尾须分2瓣,瓣间宽阔深凹;肛下板略短于尾须,分2瓣， 瓣间宽阔浅凹;阳茎骨化,略短于抱器基节(参见图C.2中F,G,H,I) -雌虫生殖节;产卵器较长,可伸缩 尾须融合、不分瓣,不骨化,近圆柱状,具稀疏的长刚毛,末 端着生微刺;肛下板细管状,不骨化,密被短毛,末端着生若干长刚毛(参见图C.2中J 8.3.2 卵 长卵圆状,呈淡红色,长约0.60mm,其长为宽的5倍左右 8.3.3幼虫 初龄幼虫体色为白色至乳白色,至老熟后转变为橘红色;老熟幼虫体长1.50mm一2.50mm,最长 可达3.00mm 蛹 8.3.4 离蛹,包覆于白色丝质茧中;体色橘红色.体长1.90mm2.00mm. 8.4苹果瘦蚊与近似种的区别 苹果樱蚊与重要近似种梨叶蚊D.pyri(Bouche,1847)区别如下 -成虫:;前者雄虫生殖节抱器端节略直、弯曲不明显,且其基部明显膨大,而后者雄虫抱器端节向 内均匀弯曲明显,且其基部不明显膨大;前者雄虫肛下板端缘浅凹,即其凹形长明显短于宽,而 后者雄虫肛下板端缘明显深凹,即其凹形宽明显短于长(参见图C.3)
GB/I33020一2016 附录A 资料性附录 苹果瘦蚊地理分布、寄主植物,生物学特性和危害特点 A.1 地理分布 遍布欧洲(奥地利、比利时、保加利亚、前捷克斯洛伐克、芬兰、前南斯拉夫,法国、德国、匈牙利、意大利、 马其顿、荷兰、挪威、波兰、罗马尼亚、俄罗斯、瑞典、瑞士和英国);后传人美国、加拿大、阿根廷和新西兰 A.2寄主植物 蓄薇科的苹果属植物Malusspp.(Rosaceae),目前记录的寄主多为MalusdomesticaBorkhausen. 且该种痿蚊对苹果各品种(或品系)的偏好性不一 A.3生物学特性 苹果痿蚊成虫将卵产在苹果嫩叶边缘;由卵孵化出的幼虫取食叶片组织并造成叶片卷曲和提前落 叶现象,而幼虫则在卷叶内发育,但通常在土壤中化蛹;蛹在适当时间羽化成虫并交配,每头雌虫一般可 产200个卵 因各地气候条件的差异,苹果壑蚊完成一个世代的时间需35d一60d 在温带地区(如加 拿大),一年仅发生2代3代 而在较温暖的区域(如新西兰北岛),一年可发生6代7代 A.4为害特点 受苹果叶癌蚊为害的苹果植株出现末梢叶片卷曲的现象,部分卷曲叶片略呈红色 通常以幼苗期 为害严重,由于苹果叶片卷曲和提前落叶而影响光合作用的进行,因而严重阻碍植株生长并影响果实产 量参见图A.1 注;引自Anforaetal.,2005 图A.1苹果瘦蚊幼虫的苹果叶片为害状
GB/T33020一2016 附 录 B 资料性附录 苹果瘦蚊玻片标本制作方法 B.1将75%乙醇溶液中的成虫标本取出二翅,置于载玻片上,滴一滴加拿大树胶,封片即成翅的标本 B.2将剩余成虫部分在5%10%的氢氧化钠中水浴短时加热,后转人95%乙醇溶液中脱水5min~ 10nmin,再转人无水乙醇溶液脱水5min10min B.3二甲苯-苯酚混和液(3;1)中透明 B.4无水乙醉溶液中清洗 B.5香柏油中进一步透明并解剖,将成虫解剖为头、,胸(具足)和腹三个部分 B.6封片;在载玻片上每滴一滴中性树胶,分别取虫体的一部分置于胶中整姿并封片 依次完成三部 分封片 整姿时,使头部正面向上,触角伸向背侧,雄虫腹部背面朝上,雌虫腹部侧面朝上,以便雄虫外 生殖器和雌虫产卵器展示出主要的鉴定特征;胸部侧面向上,以展示出足;翅平展 B.7贴好标签,自然干燥15d40d或放人35C40C干燥箱中烘干48h以上
GB/T33020?2016 ? c ?? ?ú?ó??? ??ó???μ?C.1?C.2,?ó???μ?C.3 0.1mmm 0.1mm 0.1mm 1.0mm ?: ??); С?); B -?С(); ?? ?C.1?ó???(1
GB/T33020一2016 0.05mm 0.1nmm 0.1mm 0.1mm 0.1mm 0.1mm 说明 雄虫踏节爪(侧面观) -阳茎与中基瓣(腹面观)1 E F -雄虫外生殖节(背面观; -阳茎与中基瓣(背面观):; -抱器端节(腹面观》; -雕虫产卵器末端《腹侧面观》) G 图C.2苹果瘦蚊成虫形态特征图(2)
GB/T33020一2016 说明 K 雄虫外生殖节(背面观); 抱器端节(腹面观); M -阳茎、抱器基节中基瓣与肛下板(背面观 引自Ga还ne&Haris1998. 注 图c.3梨叶瘦蚊成虫形态特征图
GB/T33020一2016 参 考 文 献 [1]江明耀.苹果癌蝇(Da ali)风险分析报告.台北;有害生物风险分析报告编委会 as1ne4r1a 2007,1-14.[2009-01-13].http://ww w.laphiqgow.tw/pwblie/Data/612229392171.,pd. [2]Anfora,G.,Isidoro,N.,DeCristofaro,A.,loriatti,C.DeseriptionofMacrolabis、mal sp.nov. DipteraCcidomyidae),anewinqu fromgallsofDa. sineuramalionapplein udlnegallmidlgespecies Italy.BulletinofInsectology,2005,58(2):95-99. [3]Barmes,H.F:.[ODservationsonGallmidgesafeetingFruitTirees].JourmaloftheSoutheastemnAgri culturalCollegeWye,1931,28:l70-177 []Bouehe,P.F.Beirige" zurKenntnissderInsekten-Iarven.StettinerentomologischeZeitung， 1847,8:142-146. [5]Gagne,R.J.UpdateforACatalogoftheCecidomyidae(Diptera)oftheworld.USDA.Wash- ingtonC.2010,1-544.[2010-11-23].http://www.ars.usda.gov/SP2UserFiles/Place/12754100/Gagne2010 WorldCatalog_Ceeidomyidae.,pdf. [6]Kieffer,J.J.Etudesurlescecidomyiesgallicole.AnnalesdelaSocieteScientifiquedeBrux elles,1904,28;329-350,lpl. [[7]Gagne,R.J.,Harris,M.O.ThedistinctionbetweenDasineur spp.(Dptere :Cecidomyiidae) fromappleandpear.ProceedingsoftheEntomologicalSocietyofWashington,1998,100:445-448 10o

苹果瘿蚊检疫鉴定方法GB/T33020-2016

1. 引言

苹果瘿蚊是一种寄生于苹果树上的昆虫，其在苹果生长期间大量繁殖会导致苹果减产和质量下降。因此，对苹果瘿蚊进行检疫鉴定是十分必要的。

2. GB/T33020-2016标准介绍

GB/T33020-2016是我国针对苹果瘿蚊的检疫鉴定方法制定的标准。该标准主要从样品采集、显微镜检测和PCR检测等方面进行了规范。

3. 样品采集

在苹果生长期间，应选择有瘿蚊虫卵或成虫的苹果叶片、芽和嫩枝等部位作为样品。采集时需要注意的是，应该避免损伤自然表面和周边健康组织，以免影响检测结果。

4. 显微镜检测

显微镜检测是检测苹果瘿蚊的关键环节。标准规定，在检测过程中应该使用透明贴片将样品覆盖，并在显微镜下观察虫卵和成虫的形态特征进行鉴定。

5. PCR检测

GB/T33020-2016标准中规定了PCR检测方法，该方法可以更加精确地检测苹果瘿蚊。在检测过程中需要严格控制实验条件，确保结果的准确性。

6. 结论

GB/T33020-2016为苹果瘿蚊的检疫鉴定提供了具体而规范的方法，对于保障农业生产安全和防止病害传播具有重要意义。

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2022/10/1 13:04:30 现行