国家标准 GB/T29405一2012 粮油检验谷物及制品脂肪酸值测定仪器法 nspeetionofgrainandoils一Determinationoffataeidityofeerealandcereal products一lnstrumentalanalysismethod 2012-12-31发布 2013-06-20实施国家质量监督检验检疫总局发布国家标准化管理委员会国家标准
GB/T29405一2012 前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任本标准由国家粮食局提出本标准由全国粮油标准化技术委员会(SAC/TC270)归口本标准光度滴定仪法起草单位;储备粮管理总公司成都粮食储藏科学研究所、储备粮管理总公司本标淮光度滴定仪法主要起草人;何学超,高素芬,汪喜波、石恒,董德良、肖学彬、杨军、毛根武、郭道林、杨健、兰盛斌、丁建武,张华昌本标准智能电位滴定仪法起草单位;北京粮油食品检验所,北京先驱威锋技术开发公司本标准智能电位滴定仪达主要起草人周光俊,范飞、王彩琴、夏吉安、岗琴、刘志刚、王海滨、张明政、尹相龙
GB/T29405一2012 粮油检验谷物及制品脂肪酸值测定仪器法范围本标准规定了光度滴定仪法和智能电位滴定仪法测定谷物及制品腊肪酸值的术语和定义.原理,试剂与材料,仪器和设备,操作步骤,结果计算与表示本标准光度滴定仪法适用于稻谷,糙米,大米脂肪酸值的测定智能电位滴定仪法适用于玉米、稻谷、糙米、大米、小麦粉脂肪酸值的测定规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件 GB/T601化学试剂标准滴定溶液的制备 GB5491粮食,油料检验托样,分样法 GB/T5497粮食、,油料检验水分测定法 GB/T6682一2008分析实验室用水规格和试验方法术语和定义下列术语和定义适用于本文件 3.1 脂肪酸值fatacidity 试样中游离脂肪酸的含量以中和100g试样干物质中游离脂肪酸所需氢氧化钾的毫克数表示即以干基KoH计单位为mg/100g 光度滴定仪法原理在一定温度条件下,用无水乙醇提取试样中的游离脂肪酸,以百里香酚蓝指示液做指示剂,用氢氧化钾标准溶液滴定采用光学传感器检测透过滴定体系溶液的光能量变化,自动判定滴定终点,人工读数或自动记录提取液消耗氢氧化钾标准溶液的体积同时,通过微处理器系统,利用内置模式识别系统来控制滴定过程和处理滴定结果 4.2试剂与材料除非另有规定,所有试剂均为分析纯,实验用水应符合GB/T6682一2008中三级水的规格 4.2.1 无水乙醇 4.2.295%乙醇
GB/T29405一2012 4.2.3N,N-二甲基甲酰胶 4.2.4百里香酚蓝 4.2.5中性乙醇:量取20mlL95%的乙醇(4.2.2),滴加5滴酚酣指示剂(4.2.8),用氢氧化钾标准滴定溶液(4.2.7)滴定至微红色,并于30s内不褪色,记下所耗氢氧化钾标准滴定溶液毫升数(V.);量取 00mL.95%的乙醇,准确加人V，mLV,=25XV.)复氧化钾标准滴定溶液,混合均匀备用 4.2.6氢氧化钾标准储备液.0.5mol/儿按GB/T601配制和标定,储于聚乙烯塑料瓶中注;氢氧化钾标准储备液在常温(15C一25C)下保存时间一般不超过2个月当溶液出现浑浊、沉淀、颜色变化等现象时,应重新配制 4.2.7氢氧化钾标准滴定溶液:0.01mol/L 准确移取10.0m氢氧化钾标准储备液(4.2.6)于 500ml容量瓶中,用中性乙醇(4.2.5)定容,混匀后置于聚乙烯塑料瓶中临用前配制 4.2.8l0g/L盼酞指示剂;称取1.0g盼酞溶于100mL95%的乙醉(4.2.2) 4.2.90.02g/L百里香酚蓝指示液;称取百里香酚蓝(4.2.4)0.02g(精确至0.0001g),用333ml N,N-二甲基甲酰胺(4.2.3)溶解,再用无水乙醇(4.2.1)定容到1000 nml,混匀,置于棕色瓶中保存 4.2.10滤纸;快速定性滤纸,预先折叠仪器和设备 4.3.1光度滴定仪;配75mL测量杯和加液装置加液装置体积精度0.01ml 光度滴定仪分为全自动光度滴定仪和半自动光度滴定仪,其原理、技术参数和评价指标参见附录A 4.3.2天平:感量0.01g 4.3.3振荡器;往返式,振荡频率为100次/nmin. 43.4实验磬谷机 43.5粉醉机;带0.8m圆孔筛片的锤式磨,粉碎时应保持样品不发热 4.3.日具塞磨口锥形瓶;250mL. 4.3.7玻璃短颈漏斗 4.3.8移液管;50mL、,25mL、,10mL 4.3.9具塞试管(大于25mL)或具塞锥形瓶(50mL 4.4操作步骤 4.4.1托样和分样按GB5491执行 4.4.2试样的制备 4.4.2.1稻谷试样制备;分取稻谷试样100g以上,用著谷机(4.3.4)脱壳再取脱壳后的糙米约 80g,用粉碎机(4.3.5)粉碎,收集全部粉碎样品,充分混合均匀后装人磨口瓶中备用 4.4.2.2糙米,大米试样制备;分取糙米,大米试样约80g,同4.4.2.1粉碎,装瓶备用注:试样制备后,应在2h.内进行游离脂肪酸提取,以避免试样中脂肪酶的水解作用 4.4.3试样含水量测定按GB/T5497定温定时烘干法执行 4.4.4提取称取试样(4.4.2)10g士0.01g于250mL具塞磨口锥形瓶(4.3.6)中,用50mL移液管(4.3.8) 准确加人50ml无水乙醇(4.2.1),摇匀,置振荡器(4.3.3)上振摇101 min
GB/T29405一2012 4.4.5过滤振荡后静置1min 1一2min,用玻璃短颈漏斗(4.3.7)和滤纸(4.2.10)过滤,弃去最初几滴滤液,用具塞试管或具塞锥形瓶(4.3.9)收集滤液25ml以上 4.4.6滴定光度滴定仪(4.3.1)的滴定管加满氢氧化钾标准滴定溶液(4.2.7),并自动校正零点用25ml.移液管(4.3.8)准确移取25.0mL滤液至测量杯中,再用另一支移液管准确移取25.0mL百里香酚蓝指示液(4.2.9)至测量杯中,加人搅拌子将测量杯放人仪器渊量池巾井盖上盖,启动"滴定"按钮,当"终点”指示灯亮时即为滴定终点,光度滴定仪自动停止滴定采用半自动光度漓定仪滴定,人工记下所耗用的氢氧化钾标准滴定溶液体积(V,) 采用全自动光度滴定仪滴定,仪器自动记存所耗用的氢氧化钾标准滴定溶液体积(V,) 4.4.7空白试验用25.0ml无水乙醇(4.2.1)代替滤液,其余操作同4.4.6 采用半自动光度滴定仪滴定,人工记下所耗用的氢氧化钾标准滴定溶液体积(V.) 采用全自动光度滴定仪滴定,仪器自动记存所耗用的氢氧化钾标准滴定溶液体积(V,. 4.4.8平行试验取两份平行试样,按4.4.44.4.6分别进行测定 4.5结果计算 4.5.1采用半自动光度滴定仪滴定,试样脂肪酸值(Ak)按式(1)计算: 2oc二义 100 AK= 100 式中: 试样脂肪酸值(以KoH计),单位为毫克每百克(mg/100g); AN 换算成氢氧化钾毫克数的常数,即56.1×2×100， 11220 滴定25nL试样提取液所耗氢氧化娜标准滴定溶液体积,单位为毫升(mL); V V -滴定空白液所耗氢氧化钾标准滴定溶液体积,单位为毫升(mL) 氢氧化钾标准滴定溶液的浓度,单位为摩尔每升(mol/L); -试样质量,单位为克(g) mn -试样水分质量分数,即100只试样中含水的质量,单位为克(g) 4.5.2采用全自动光度滴定仪滴定,输人试样含水量(4.4.3)和试样质量(4.4.4)后,仪器自动计算出试样脂肪酸值(以KOH计),以毫克每百克表示(mg/100g). 智能电位滴定仪法 5.1原理在一定温度条件下,用无水乙醉提取稻谷、糙米,大米,玉米中的游离脂肪酸,以苯提取小麦粉中的游离脂肪酸,用氢氧化钾标准溶液滴定,以电极作为指示终点的传感器,在滴定终点附近,被测离子的浓度发生突变,引起电极电位的突跃,采用模糊逻辑控制算法(灰度模型)与反向传播算法(BP神经网络控制滴定过程,采集电极的动态信号,根据拟和曲线确定滴定终点,仪器自动计量并计算试样脂肪酸值
GB/T29405一2012 2 55 试剂与材料除非另有规定,所有试剂均为分析纯,实验用水应符合GB/T6682一2008中三级水的规格无水乙醇 5.2.1 5 2. 95%的乙醇 2 55 2.3中性乙醇;同4.2.5 5.2.4氢氧化钾标准储备溶液.同4.2.6. 5.2.5氢氧化钾标准滴定溶液;同4.2.7 5.2.6酚酣指示剂;同4.2.8 5.2.7滤纸;同4.2.1o 5 2. 8 5.3仪器和设备除4.3.2一4.3.9规定的外,还包括以下仪器设备 5.3.1智能电位滴定仪或电位滴定仪;配150mL测量杯(杯口可加橡胶密封圈)和馈液装置,最小馈液量0.0005nmL,体积精度0.01mL 电位滴定仪原理技术参数和评价指标参见附录B pH复合电极;电极斜率应保证在90%一105%. 5.3.2 5.3.3磁力搅拌台;搅拌速度可连续调节 5.4操作步骤 5.4.1托样和分样按GB5491执行 5.4.2试样制备 5.4.2.1稻谷同4.4.4.1,糙米和大米同4.4.4.2 .4.2.2玉米;分取试样约80g,用粉碎机(4.3.5)粉碎,收集全部粉碎样品,充分混合均匀后装人磨口 5. 瓶中备用 5.4.2.3小麦粉;分取试样约80g,装人磨口瓶中备用注:试样制备后,应在2h内进行游离脂肪酸提取,以避免试样中脂肪酶的水解作用 5.4.3试样含水量测定同4.4.3 5.4.4称样、提取和过滤 5.4.4.1稻米试样;同4.4.4一4.4.5 5. .4.4.2玉米试样;玉米试样提取时间为30nmin,其他操作同4.4.4一4.4.5 小麦试样称取小麦粉试样20g土0.01[脂肪酸值(以KoH计)高于60mg/100g时称试样 5.4.4.3 10g于250mL锥形瓶中,加人50m苯,加塞摇动几秒钟后,打开塞子放气,再盖紧瓶塞置振荡器振荡30min(或用手振荡45min),振荡频率为100次/min 其他操作同4.4.5
GB/T29405一2012 5.4.5滴定 5.4.5.1 仪器准备按仪器操作说明书进行 5.4.5.2滴定 5.4.5.2.1 玉米粉、糙米粉、大米粉试样;用25ml移液管精确移取25.0ml滤液至测量杯中,加人 50ml.无二氧化碳蒸水,放人搅拌子,将测量杯放在磁力搅拌台上,将滴定支架落下,电极与进液管浸人液面下小麦粉试样,用25mL移液管精确移取25.0mL滤液至测量杯(带有橡胶密封圈)中,再用 5.4.5.2.2 一支25mL移液管移取25.0mL.95%乙醇(5.2.2)至测量杯(带有橡胶密封圈)中,加人搅拌子将另测量杯(带有橡胶密封圈)放在磁力搅拌台上,将带有密闭上盖的滴定支架落下,电极与进液管浸人液面下 5.4.5.2.3根据被测试样选择“玉米”“稻谷”(稻谷、糙米、大米样品均选择“稻谷”)、“小麦”按键后，按“启动”键开始测定,仪器自动判断终点并停止滴定仪器自动记存所耗用的氢氧化钾标准滴定溶液体积(V 5.4.6空白试验测定玉米粉、大米粉试样时用25.0mL无水乙醇(4.2.1)、测定小麦粉试样时用苯(5.2.8)代替滤液,其余操作同5.4.5.2 仪器自动记存所耗用的氢氧化钾标准滴定溶液体积(V,) 5.4.7结果计算输人试样含水量(54.3)和试样质量(5.4.4),仪器自动计算出试样脂肪酸值(以KOH计),以毫克每百克表示(mg/100g). 结果表示两个平行测定结果之差的绝对值符合重复性(见第7章)要求时.以其平均值为测定结果计算结果保留到小数点后一位重复性在同一实验室,由同一操作者使用相同的设备,按相同的测试方法,在短时间内对同一份被测样品进行两次测定获得的两个独立的测定结果(以KOH计)的绝对差值不大于2mg/100g
GB/T29405一2012 附录A 资料性附录光度滴定仪 A.1原理运用光度滴定原理,利用滴定体系的颜色变化,通过光学传感器检测到透过滴定体系溶液的光能量变化,反应滴定体系溶液的颜色变化,再经过微处理器系统,利用内置模式识别系统来控制滴定过程并处理滴定结果 A.2 般说明光度滴定仪由光电检测装置、滴定液馈液系统、信号采集系统、滴定控制、数据处理与分析系统、显示与查询系统、数据网络接口系统和打印系统等组成,基本结构见图A.1. 显示与滴定液惯液系统查询系统滴定控制数据网络数据处理接口系统分祈系统信号x 集系统器打印系统搅拌系统图A.1光度滴定仪结构图 A.3工作条件 A.3.1温度:15C一25C A.3.1相对湿度:20%一80% A.3.3电源;220V士22v A.3.4频率;50Hz士1H2
GB/T29405一2012 4 性能参数及评价指标 A， A.4.1单色光源峰值波长:620nm士10 nm A.4.2加液装置.体积精度0.01mL A.4.3仪器能连续工作时间:大于24h A.4.4适用于稻谷、糙米,大米脂肪酸值的测定 A.4.5到达滴定终点时能自动停止滴定 A.4.6测定结果准确度;与GB/T15684一1995测定值比较,绝对差值(以KOH计)不超过2mg" l00 g A.4.7测定结果重复性;平行测定同一样品,绝对差值(以KoH计)不超过2mg/100g
GB/T29405一2012 附录 B 资料性附录智能电位滴定仪 B.1原理运用电位滴定原理,以电极作指示终点的传感器,在滴定终点附近,被测离子的浓度发生突变,引起电极电位的突跃,通过准确测定滴定体系中的电位,利用模糊逻辑控制算法(灰度模型)与反向传播算法(BP 神经网络)控制滴定过程并处理滴定结果,根据拟和曲线确定滴定终点并处理滴定结果 B.2 -般说明智能电位滴定仪由滴定控制系统、馈液装置、搅拌装置和打印装置组成,基本结构见图B.1 滴定控制电信号数据处理打印机呆集系统分桥系统传感器滴定波惯液系统搅拌器滴定液图B.1智能电位滴定仪结构示意图 B.3工作条件 B.3.1温度:15C一25C B.3.2相对湿度;20%80% B.3.3电源:220V士22V B.3.4频率:50Hz士1Hz B.4性能参数及评价指标 B.4.1适用于稻谷、糙米、大米、玉米、小麦粉脂肪酸值的测定
GB/T29405一2012 B.4.2测量范围:pH:0十20.00;电位:0士2000mV B.43分辨率;pH.0.o1;电位;0.lmv B.4.4输人阻抗;10Q. B.4.5有效精度;士0.5mV B.4.6体积精度:0.01ml,最小馈液0.0005 ml B.4.7外围接口:打印机接口;RS232C接口 B.4.8仪器能连续工作时间:大于24h B.4.9到达滴定终点时能自动停止滴定 B.4.10测定结果准确度;与GB/T15684一1995和GB/T5510一1985测定值比较,绝对差值不超过 2mg/100g(以KOH计. B.4.11测定结果重复性;平行测定同一样品,绝对差值不超过2mg/100g(以KOH计.
GB/T29405一2012 参考文献 [1] GB/T55101985粮食,油料检验脂肪酸测定法 [2] GB/T15684一1995谷物制品脂肪酸值测定法 10o

粮油检验谷物及制品脂肪酸值测定仪器法GB/T29405-2012

脂肪酸是脂类和油脂中的重要成分之一，对人体健康具有重要作用。因此，在粮油加工企业、食品生产企业等领域，脂肪酸值的测定显得尤为重要。GB/T29405-2012《粮油检验谷物及制品脂肪酸值测定仪器法》给出了脂肪酸值的测定方法和仪器要求，下面将详细介绍。

一、脂肪酸值的测定方法

GB/T29405-2012规定了两种测定方法：

直接测定法：适用于脂肪酸值在0.2%以上的样品。
间接测定法：适用于脂肪酸值在0.02%~0.5%之间的样品。

二、仪器要求

GB/T29405-2012规定了脂肪酸值测定所需的仪器和设备，包括：

天平：分度值不大于0.1mg，灵敏度不低于0.01mg。
摇床或振荡器：摇幅应为30mm，频率为120次/分钟左右。
滴定管：容量为50mL，分度值为0.1mL。
比色皿：光程长度为10mm。
分光光度计：波长范围应在320nm~660nm之间。

三、操作步骤

以下是使用直接测定法进行脂肪酸值测定的一般操作步骤：

将样品制备成20mg左右的试样，并称重记录。
加入硫酸正丁酯和异丙醇，在摇床上振荡反应60分钟，使样品中的脂肪酸转化为对应的正丁酯。
加入苯酚和氢氧化钾，再在60℃水浴中振荡10分钟，使反应结束。
用水洗涤，然后用氯仿提取，分别分离水相和有机相。
将有机相滴入碳酸钠溶液中进行滴定，记录滴定量。

四、注意事项

在脂肪酸值测定过程中，需要注意以下几点：

所有实验操作都应该在通风良好的条件下进行，以避免危险物质的吸入和污染环境。
实验室应该配备相应的安全设施，包括危险品储存柜、紫外线消毒器等。
操作时应注意个人防护，穿戴实验服、手套、护目镜等。
仪器和设备应该定期进行维护和检修，确保其正常运作。

总之，GB/T29405-2012规定了脂肪酸值的测定方法和仪器要求，使用正确的操作步骤和仪器设备可以准确测定样品中的脂肪酸值。这对于粮油加工企业、食品生产企业来说具有重要意义，能够保证产品的质量和安全性。