GB/T31579-2015
粮油检验芝麻油中芝麻素和芝麻林素的测定高效液相色谱法
Inspectionofgrainsandoils—Determinationofsesaminandsesamolininsesameoilbyhighperformanceliquidchromatography
- 中国标准分类号（CCS）X14
- 国际标准分类号（ICS）67.200.10
- 实施日期2015-11-28
- 文件格式PDF
- 文本页数9页
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粮油检验芝麻油中芝麻素和芝麻林素的测定高效液相色谱法
国家标准 GB/T31579一2015 粮油检验芝麻油中芝麻素和芝麻林素的 测定高效液相色谱法 Inspeetionofgrainandoils一Determinationofsesaminandsesamolininsesameoil一 Highperformmanceliquidchromatography 2015-05-15发布 2015-11-28实施 国家质量监督检验检疫总局 发布 国家标准化管理委员会国家标准
GB/T31579一2015 前 言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草
本标准由国家粮食局提出
本标准由全国粮油标准化技术委员会(SAC/TC270)归口
本标准负责起草单位:上海市粮食科学研究所
本标准参加起草单位:上海三添食品有限公司、食品药品检定研究院食品化妆品检定所、 标准化研究院食品与农业标准化研究所,安徽华安食品有限公司、东莞顶志食品有限公司,安微国家农 业标准化与监测中心 本标准主要起草人;曹文明,薛斌、陈风香、曹进、丁宏、李坤威、何俊、徐彦辉、郭海英、袁超
GB/T31579一2015 粮油检验芝麻油中芝麻素和芝麻林素的 测定高效液相色谱法 范围 本标准规定了高效液相色谱法测定芝麻油中的芝麻素和芝麻林素的术语和定义、原理,试剂和耗 材仪器设备,试样的制备、分析步骤,结果计算以及精密度 本标准适用于芝麻香油、.芝麻原油和成品芝麻油中芝麻索和芝麻林素的测定
本标准方法的检出跟为芝麻素001mg/E;芝麻林素0.02m g/g
规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的
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GB/T6379.12004测量方法与结果的准确度(正确度与精密度第1部分;总则与定义 GB/T6379.2一2004测量方法与结果的准确度(正确度与精密度第2部分;确定标准测量方 法重复性与再现性的基本方法 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法(GB/T6682一2008/Iso3696;1987,MOD) GB/T15687动植物油脂试样的制备(GB/T15687一2008/Is661:2003,IDT) 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件
3.1 芝麻素sesaminm 又称芝麻脂素,芝麻主要的天然木脂素(木盼素)类物质之一,CAS编号,607-80-7;分子式,CaH.O 分子量,354.35
分子结构参见附录A
3.2 芝麻林素sesamolinm 又称芝麻盼林,芝麻主要的天然木脂素(木盼素)类物质之一,CAs编号,526-07-8;分子式,CH.O 分子量,370.35
分子结构参见附录A
原理 样品中的芝麻素和芝麻林素采用固相萃取技术,提取、净化和富集后,用高效液相色谱仪进行测定 紫外检测器外标定量
试剂和耗材 甲醇:色谱纯
GB/T31579一2015 5.2三氯甲炕
5.3丙酮
5.4环己婉
5.5正己烧
5.6异丙醉
5.7sPE上样液;正已烧十三氯甲烧=70十30,取30mL的三氯甲婉(5.2),加人70mL的正己婉(5.5) 中混匀,现用现配 5.8SPE淋洗液;环己炕十丙酮=90十10,取10ml的丙酮(5.3),加人90mL的环己烧(5.4)中混匀. 现用现配
5.9SPE洗脱液:环己烧丙酮=8020,取20ml的丙酮(5.3),加人80ml的环己烧(5.4)中混匀 现用现配
5.10流动相甲醇十水=75十25
取250ml的水,加人750mL的甲醉(5.1)中混匀,通过0.45m的 滤膜(6.4)过滤并脱气
5.11标准物质;芝麻素,纯度>98%;芝麻林素,纯度>98%.
5.12标准储备液;精确称量20mg的芝麻素(5.11)标准物质,加人适量的甲醇(5.1),搅拌至完全溶解 后转移至100mlL棕色容量瓶中,再用甲醉(5,1)定容,配制成浓度为200mg/L的芝麻素标准储备液， /L的 冷藏保存
采用同样的方法,精确称量20mg的芝麻林素(5.11)标准物质,配制成浓度为200mg/ 芝麻林素标准储备液,冷藏保存 5.13标准工作液;分别准确移取芝麻索和芝麻林素的标准储备液(5.12)各0.2mL.,0.4nmlL、1mL 2mL和5mL,分别用甲醇(5.1)稀释定容至10mL.得到一系列浓度不同的芝麻素和芝麻林素的混合 标准工作溶液(芝麻素和芝麻林素浓度均分别为4mg/1L,8mg/L,20mg/I、40mg/1和100mg/L)
5. 1425ml.棕色容量瓶
5.1515ml平口试管
5 nml,10ml一次性塑料注射器
5. .17 硅胶固相萃取柱,规格:1g/6mlL,非键合硅胶固定相,粒径40m一60Am及其配套转接头
5.18氨基固相萃取柱,规格;500mg/3mL,氨丙基键合硅胶固定相,粒径40Am一60unm及其配套转 接头
5.19以上所用试剂,除特殊注明外均为分析纯试剂,水为符合GB/T6682规定的一级水
仪器设备 分析天平:感量0.0001g" 6.1 6.2高效液相色谱仪;配备紫外检测器
6.3碟形过滤器;尼龙,有机相,直径13mm,孔径0.45umm
滤膜;孔径0.5m,直径45mm的尼龙膜或相当者 6.4 6.5微量进样器:20L 6.6氮气吹干仪;选配
试样的制备 按GB/T15687规定的方法制备试样
GB/T31579一2015 分析步骤 8.1样品的提取,净化和富集 8.1.1固相萃取柱的活化 取硅胶固相萃取柱(5.17)和氨基固相萃取柱(5.18)各一支,用10nL的塑料注射器(5.16)分别吸 取10ml和5mL的sPE上样液(5.7),分别冲洗硅胶固相萃取柱和氨基固相萃取柱,使固相吸附剂完 全被液体溶剂浸润,应防止干澜,但溶剂的液面也不能高于固相吸附剂
然后将氨基固相萃取柱连接在 硅胶固相萃取柱的上端,形成串联双柱
8.1.2固相萃取 称取0.5g芝麻油样品,精确至1mg,用2mlSPE上样液(5.7)充分溶解,用5ml的塑料注射器 (5.16)吸取样液后.以(1一2)滴/s的速度通过串联双柱(8.1.1)
上样过程中应保持串联双柱处于溶剂 浸润状态,防止干
弃去流出的液体;再用同一支5mL的塑料注射器吸取5mL的sPE上样液,以 2滴/左有的迷度洗涤双柱,并用空气吹干上端的氨基固相萃取柱,同时保持下层的硅胶固相萃取柱处 于溶剂浸润状态,弃去洗涤液,取下上端氨基固相萃取柱;仍用同 支5ml的塑料注射器吸取3ml的 SPE上样液,以( 2)滴/s的速度单独洗涤硅胶固相萃取柱,并保持硅胶固相萃取柱处于溶剂浸润状 态,弃去洗涤液;仍用同 2)滴/s的速度 ml 单独洗涤硅胶固相萃取柱， 气吹干硅胶固相萃取柱,弃去洗涤液;最后取1支干净的10ml的塑 料注射器(5.16)吸取10mL的SPE洗脱液(5.9),以(23)滴/s的速度洗脱硅胶固相萃取柱,并用空气 吹干硅胶固相萃取柱,收集全部洗脱液于一个25mL的棕色容量瓶(5.14)中,并用异丙醇(5.6)定容,作 -支15mL的试管(5.15)中,然后置于50C的复气吹干仪(6.G7 为样品提取液或者收集全部洗脱液于一 的水浴中,氮气吹干溶剂后,用异丙醇溶解残留物,转移人25mL棕色容量瓶,再用异丙醇定容为样品 提取液]
样品提取液用碟形过滤器(6.3)过滤后进行液相色谱测定
8.2高效液相色谱测定 高效液相色谱参考条件 8.2.1 高效液相色谱检测的参考条件如下 色谱柱:VenusilXBPC柱(长250mm,内径4.6mm,填料粒径5Am)及其配套保护柱(也可 使用其他品牌等效的C液相色谱柱) 进样量;20L b c)流动相;甲醇十水(5.13); d流浊;lmL/min; e)柱温:30C; 紫外检测器波长;287nm f 8.2.2样品测定 用微量进样器(6.5)分别吸取等体积的各个芝麻素和芝麻林素标准工作溶液(5.13)以及样品提取 液(8.1.2)进行分析,测定峰面积,以各个标准工作液的芝麻素或芝麻林素的浓度为横坐标,对应的芝麻 素或芝麻林素的峰面积为纵坐标,分别绘制芝麻素和芝麻林素的标准工作曲线,并求得样品提取液相应 的芝麻素或芝麻林素的浓度(e) 芝麻素和芝麻林素的标准品及样品测定的色谱图见附录B
GB/I31579一2015 结果计算 芝麻素和芝麻林素的含量分别按式(1)进行计算 c×V X= m×1000 式中: -样品中芝麻素或芝麻林素的含量,单位为毫克每克(mg/g); 一通过标准工作曲线获得的样品提取液中的芝麻素或芝麻林素的浓度,单位为毫克每升(mg/L) 样品提取液的定容体积,单位为毫升(mL). -样品的称样量,单位为克(e. 7 计算结果保留至小数点后两位
10 精密度 根据GB/T6379.1一2004和GB/T6379.2一2004的相关要求,芝麻素和芝麻林素的检测精密度以 实验室间的比对实验的统计分析结果表示,详见表1和表2
表1芝麻素的检测精密度 项目 样品1 样品2 样品3 10 10 参加比对的实验室的数量 10 可接受结果的实验室的数量 10 10 获得可靠检测结果的数量 38 48 48 平均值/(mg/e) 4.88 3,35 1.l4 重复性标准偏差(S,)/(mg/g) 0.18 0.13 0.05 3.65 3.89 4.78 重复性变异系数/% 重复性限(2.8×s,/mg/g 0.50 0.36 0.15 再现性标准偏差(SR/mg/g) 0.23 0.l6 0.07 再现性变异系数/% 4.65 4.80 5.82 再现性限(2.8×SR/mg/g 0.64 0.45 0.19 表2芝麻林素的检测精密度 项目 样品1 样品2 样品3 10 10 参加比对的实验室的数量 10 可接受结果的实验室的数量 获得可靠检测结果的数量 43 45 45 平均值/(mg/) 3.32 1.49 0.59 重复性标准偏差(S,/n 0,06 0.02 0.08 (mg/g 重复性变异系数/% 2.45 4.18 4.16
GB/T31579一2015 表2(续 样品 样品2 样品3 项目 重复性限(2.8×
GB/T31579一2015 附 录 B 资料性附录 芝麻素和芝麻林素的液相色谱图 AU 57.5 35.0 12.5 -10.0 1.0 5.7 8.0 10.3 12.7 15.0 保留时间/min" 图B.1芝麻素和芝麻林素标准色谱图 AU 207.5 135.0 62.5 -10.0 10.3 12.7 15.0 保留时间/min 图B.2样品提取液中芝麻素和芝麻林素色谱图
粮油检验芝麻油中芝麻素和芝麻林素的测定高效液相色谱法GB/T31579-2015
芝麻油是一种常用的食用油，在中国和其他亚洲国家被广泛使用。芝麻油中含有两种重要的成分——芝麻素和芝麻林素，它们对人体健康具有重要作用。因此，芝麻素和芝麻林素的含量是衡量芝麻油质量的重要指标之一。
GB/T31579-2015是我国制定的关于芝麻油中芝麻素和芝麻林素测定的标准。该标准采用了高效液相色谱法（HPLC）进行检测，具有检测灵敏度高、准确度高、重现性好等优点。
在进行芝麻素和芝麻林素检测时，需要先将芝麻油中的成分提取出来。提取方法可以采用乙酸乙酯和正己烷混合物进行液液萃取，然后经过旋转蒸发浓缩得到样品。然后将样品溶解于甲醇中，使用HPLC仪器对其进行检测。
在实际操作中，需要注意一些细节问题。例如，在进行液液萃取时，应该避免搅拌过度，以免影响提取效果；在使用HPLC仪器时，需要根据样品性质和仪器特点进行参数设置，以保证检测结果的准确性。
总之，GB/T31579-2015所规定的高效液相色谱法是一种可靠、有效的方法，可以用于芝麻油中芝麻素和芝麻林素含量的测定。对于粮油检验人员来说，掌握这种方法可以更好地保证食品安全，维护公众健康。
