畜禽肉中癸氧喹酯残留量的测定液相色谱-荧光检测法

畜禽肉中癸氧喹酯残留量的测定液相色谱-荧光检测法

国家标准 GB/T20745一2006 畜禽肉中类氧隆酯残留量的测定 液相色谱-荧光检测法 Methodforthedeterminationofdeequinateresiduesinlivestork andpoultrymuscles- LC-fluorescencedeteetionethod 2007-03-01实施 2006-12-31发布 国家质量监督检验检疫总局 发布 中 国国家标准化管委员会国家标准
GB/T20745一2006 前 言 本标准的附录A和附录B为资料性附录 本标准由秦皇岛出人境检验检疫局提出 本标准由国家质量监督检验检疫总局归口 本标准起草单位:秦皇岛出人境检验检疫局 本标准主要起草人;庞国芳,李学民、张进杰、曹彦忠、刘晓茂,范春林,刘永明,赵为 本标准系首次发布的国家标准
GB/T20745一2006 畜禽肉中娶氧哇酯残留量的测定 液相色谱-荧光检测法 范围 本标准规定了牛、羊、猪和鸡肉中凳氧唾酯残留量的液相色谱测定方法 本标准适用于牛、羊、猪和鸡肉中类氧唾酯残留量的测定 本标准癸氧唾酯的方法检出限为0.2mg/kg 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款 凡是注日期的引用文件,其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本 凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准 GB/T6379.1测量方法与结果的准确度正确度与精密度第1部分:总则与定义 (GB/T6379.1一2004,Iso5725-l:1994,IDT) GB/T6379.2测量方法与结果的准确度(正确度与精密度第2部分:确定标准测量方法重复 性与再现性的基本方法(GB/T6379.2一2004,Iso5725-2:1994,IDT) GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法(GB/T6682一1992,neqIsO3696;1987) 原理 试样中类氧呤酯残留,用甲醇十三氯甲婉溶液提取,提取液经过浓缩后,通过反相液相色谱柱分离. 葵氧唾酯用配有荧光检测器的液相色谱仪测定,外标法定量 试剂和材料 除另有说明外,所用试剂均为优级纯,水为GB/T6682规定的一级水 4.1甲醇;色谱纯 乙睛色谱纯 4.2 4.3三氯甲炕;色谱纯 4.4提取液;甲醇十三氯甲烧(4十1) 量取80mL甲醇(4.1)与20mL三氯甲烧(4.3)混合 偏磷酸 偏磷酸游液5% 称取3.0发偏磷酸(45),用水蒂解,定容至100nml 硝酸钙[Ca(NO.)4Hl.O] 硝酸钙溶液.0.20moal 称取10.0《硝酸钙(4.7),用水溶解,定容至200mL 葵氧畦酯标准物质;纯度>99% 4.10葵氧憧酯标准储备溶液;准确称取适量的葵氧畦酯标准物质(4.9),用提取液(4.4)制成浓度为 50 4g/mL的标准储备溶液 4.110.2pm滤膜 仪器 5.1液相色谱仪:配有荧光检测器
GB/T20745一2006 5.2分析天平:感量0.1mg和0.01g 5.3均质器 5.4离心机;带有50mL离心管 5.5氮气浓缩仪 5.6微量注射器;100L 5.7刻度样品管:10ml,精度为0.1mL 测定步骤 6.1试样溶液和标准工作溶液的制备 称取5g(精确到0.01g)试样和四个空白样品,分别置于50mL离心管中,加人15mL提取液 4.4),均质2min,以4000r/min离心5min,把上层提取液移至另一个50mL离心管中,再用15ml 提取液重复提取一次,合并两次提取液,加人15mL偏磷酸溶液(4.6)和4ml三氯甲炕(4.3),混匀,以 4000r/min离心5min,弃掉上层水泮液 向四个空白样品提取液中分别加人凳氧唾酯标准储备溶液 4.10)20L,50L、100AL,200Al. AL,把样品提取液移至刻度样品管(5.7)中,利用氮气浓缩仪,在45c 水浴中浓缩至最小体积,用流动相定容1mL,涡旋溶解,然后,在一20C保持10min凝固脂肪,以 4000r/min离心5min,把上层样液通过0.2Am滤膜(4.11),同时得到浓度分别为1.04g/ml 2.5g/mL、5.0g/mL,10.04g/ml标准工作溶液,供液相色谱仪测定 测定 6 .2 6.2. 液相色谱条件 色谱柱:InertsilC5m150mm×4.6mm(内径)或相当者; aa b)流动相;硝酸钙溶液(4.8)十乙腊(4.2)十甲醇(20十3十77) 柱温:50C; c 流速:l.0ml/min; d 检测波长;激发波长326nm,发射波长384nm; 进样量:50l 6.2.2液相色谱测定 用类氧唾酯标准工作溶液(6.1)分别进样,以标准工作溶液浓度为横坐标,以峰面积为纵坐标,绘制 标准工作曲线 用标准工作曲线对样品进行定量,样品溶液中类氧唾酯的响应值均应在仪器测定的线 性范围内 在上述色谱条件下,癸氧咋酯的参考保留时间为4.094min 类氧唾酯标准物质的色谱图参见图A.1 本方法的添加回收率数据参见附录B 6.3平行试验 按上述步骤,对同一试样进行平行试验测定 空白试验 6. 除不称取试样外,均按上述分析步骤进行 结果计算 试样中类氧唾酯残留量利用数据处理系统计算或按式(1)计算 1000 x=cy又 1000 式中 试样中被测组分残留量,单位为毫克每千克(mg/kg) 从标准工作曲线得到的试样溶液中被测组分的浓度,单位为微克每毫升(g/mL);
GB/T20745一2006 心 试样溶液定容体积,单位为毫升(mL); -最终试样溶液所代表的试样质量,单位为克(g). m 精密度 本标准的精密度数据是按照GB/T6379.1和GB/T6379.2的规定确定的,其重复性和再现性的 值以95%的可信度来计算 8.1重复性 在重复性试验条件下,试样中凳氧唾酯含量在0.2mg/kg一 2.0mg/kg范围,获得的两次独立测试 结果的绝对差值不超过重复性限r,本标准的重复性限按式(2)计算 lgr=0.7668lg-1.2909 式中 nn -两次测定值的平均值 如果两次渊定值的差值超过重复性展，,则应舍弃试验结果并重新完成两次单个试验的测定 再现性 在再现性试脸条件下,试样中赞氧嗦脂含在0.2mw/小g-2.0mw/k区范围,获得的两次独立谢 结果的绝对差值不超过再现性限R,本标准再现性限按式(3)计算 R=0.1146十0.0102 式中 两次测定值的平均值
GB/T20745一2006 附录 A 资料性附录) 娶氧隆酯标准物质液相色谱图 婺氧咋酯标准物质液相色谱图,见图A. Norm 2000 4.094炎氧哇酯 1800 60o 1400 1200 1000 800 600 400 /min 7.5 图A.1娶氧唾酯标准物质液相色谱图 附录 B 资料性附录 收率 回 本标准中狡氧唾酯添加浓度及平均回收率的试验数据 在添加量为0.2mg/ke时,平均回收率为89.6% 在器加量为0.5mg/kg时,平均回收率为93.0% 在添加量为1.0mg/kg时,平均回收率为93.2% 在添加量为2.0mg/kg时,平均回收率为93.2%