GB/T6432-2018
饲料中粗蛋白的测定凯氏定氮法
Determinationofcrudeproteininfeeds—Kjeldahlmethod
- 中国标准分类号（CCS）B46
- 国际标准分类号（ICS）65.120
- 实施日期2019-04-01
- 文件格式PDF
- 文本页数6页
- 文件大小452.23KB
以图片形式预览饲料中粗蛋白的测定凯氏定氮法
饲料中粗蛋白的测定凯氏定氮法
国家标准 GB/T6432一2018 代替GB/T64321994 饲料中粗蛋白的测定凯氏定氮法 Determinationoferudeproteininfeels一Kjeldahlmethod 2018-09-17发布 2019-04-01实施 国家市场监督管理总局 发布 币国国家标准化管理委员会国家标准
GB/T6432一2018 前 言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草
本标准代替GB/T6432一1994《饲料中粗蛋白测定方法》 本标准与GB/T6432一1994相比,除编辑性修改外,主要技术内容变化如下 -修改了标准名称(见封面); -修改了适用范围(见第1章); -增加了对计算结果有效数字的规定(见第8章
本标准由全国饲料工业标准化技术委员会(SAC/TC76)提出并归口
本标准起草单位:农业科学院农业质量标准与检测技术研究所[国家饲料质量监督检验中心 北京)]
本标准主要起草人:肖志明、樊霞、马东霞、李丽蓓、王石、贾争、刘晓露、王志刚、刘军
本标准所代替标准的历次版本发布情况为 GB64321986.GB/T64321994
GB/T6432一2018 饲料中粗蛋白的测定凯氏定氨法 范围 本标准规定了测定饲料中粗蛋白质的凯氏定氮法
本标准适用于饲料原料、配合饲料、浓缩饲料、精料补充料和添加剂预混合饲料中粗蛋白质的测定
规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的
凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件
凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件
GB/T601化学试剂标准滴定溶液的制备 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T14699.1饲料采样 GB/T20195动物饲料试样的制备 原理 试样在催化剂作用下,经硫酸消解.含氨化合物转化成硫酸铵,加碱燕使氨邀出,用棚酸吸收后 再用盐酸标准滴定溶液滴定,测出氮含量,乘以6.25,计算出粗蛋白质含量
试剂或材料 除非另有说明,仅使用分析纯试剂
4.1水:G;B/T6682,三级
4.2棚酸:化学纯
4.3氢氧化钠;化学纯
4.4硫酸化学纯
44.5 硫酸铵
4.6 蔗糖
4.7混合催化剂称取0.4g五水硫酸铜、6.0g硫酸钾或硫酸钠,研磨混匀;或购买商品化的凯氏定氮 催化剂片
mL 4.8碉酸吸收液I;称取20g碉酸,用水溶解并稀释至10001 4.9砌酸吸收液I:1%砌酸水溶液1000ml.,加人0.1%澳甲酚绿乙醉溶液10ml,0.1%甲基红乙醉 溶液7mL,4%氢氧化钠水溶液0.5ml,混匀,室温保存期为1个月(全自动程序用 4.10氢氧化钠溶液;称取40g氢氧化钠,用水溶解,待冷却至室温后,用水稀释至100ml 4.11盐酸标准滴定溶液:c(HCI)=0.1 lmol/L
或0.02mol/L,按GB/T601配制和标定 4.12甲基红乙醇溶液:称取0.1g甲基红,用乙醉溶解并稀释至100ml 4.13澳甲酚绿乙醉溶液;称取0.5g澳甲酚绿,用乙醉溶解并稀释至100ml
4.14混合指示剂溶液;将甲基红乙醉溶液和嗅甲酚绿乙醉溶液等体积混合
该溶液室温避光保存,有
GB/T6432一2018 效期3个月
仪器设备 5 5.1分析天平;感量0.0001g
5.2消煮炉或电炉
5.3凯氏烧瓶:250mL 5.4消煮管;250mL
5.5凯氏蒸装置;常量直接蒸式或半微量水蒸气蒸式， 5.6定氮仪;以凯氏原理制造的各类型半自动、全自动定氮仪
o 样品 按照GB/T14699.1抽取有代表性的饲料样品,用四分法缩减取样
按照GB/T20195制备试样 粉碎,全部通过0.42mm试验筛,混匀,装人密闭容器中备用
试验步骤 7.1半微量法(仲裁法 7.11试样消煮 7.1.1.1凯氏烧瓶消煮 平行做两份试验
称取试样0.5g~2g(含氮量5mg 80mg,准确至0.0001g),置于凯氏烧瓶 中,加人6.4g混合催化剂,混匀,加人12ml硫酸和2粒玻璃珠,将凯氏烧瓶置于电炉上,开始于约 200C加热,待试样焦化、泡沫消失后,再提高温度至约400,直至呈透明的蓝绿色,然后继续加热至 少2h
取出,冷却至室温
7.1.1.2消煮管消煮 平行做两份试验
称取试样0.5g一2g(含氮量5mg一80mg,准确至0.0o01g>,放人消煮管中 加人2片凯氏定氮催化剂片或6.4g混合催化剂,12ml硫酸,于420C消煮炉上消化1h
取出,冷却 至室温
7.1.2氨的蒸懈 待试样消煮液冷却,加人20ml水,转人100ml容量瓶中,冷却后用水稀释至刻度,摇匀,作为试 样分解液
将半微量蒸馏装置的冷凝管末端浸人装有20m碉酸吸收液I(4.8)和2滴混合指示剂 4.14)的锥形瓶中
蒸汽发生器的水中应加人甲基红指示剂(4.12)数滴,硫酸数滴,在蒸过程中保持 此液为橙红色否则需补加硫酸
准确移取试样分解液10ml一20mL注人燕溜装置的反应室中,用 少量水冲洗进样人口,塞好人口玻璃塞,再加10ml氢氧化钠溶液(4.10),小心提起玻璃塞使之流人反 应室,将玻璃塞塞好,且在人口处加水密封,防止漏气
蒸憎4min降下锥形瓶使冷凝管末端离开吸收 液面,再蒸1min,至流出液pH值为中性
用水冲洗冷凝管末端,洗液均需流人锥形瓶内,然后停止 蒸馏
GB/T6432一2018 7.1.3滴定 将7.1.2蒸榴后的吸收液立即用0.1mol/L
或0.02mol/L盐酸标准滴定溶液(4.11)滴定,溶液由 蓝绿色变成灰红色为滴定终点
7.2全量法 7.2.1试样消煮 按7.1.1步骤进行
7.2.2 氨的蒸溜 7.2.2.1待试样消煮液冷却,加人60mL100ml蒸僧水,摇匀,冷却
将蒸憎装置的冷凝管末端浸人 装有25mL棚酸吸收液I(4.8)和2滴混合指示剂(4.14)的锥形瓶中
然后小心地向凯氏烧瓶中加人 0mL氢氧化钠溶液(4.10),摇匀后加热蒸溜,直至馆出液体积约为100ml.
降下锥形瓶,使冷凝管末 端离开液面,继续蒸溜1min2min,至流出液pH值为中性
用水冲洗冷凝管末端洗液均需流人锥 形瓶内然后停止蒸溜
采用半自动凯民定氮仪时,将带消煮液的消煮管插在蒸溜装置上,以25mL酬酸吸收液1 7.2.2.2 (4.8)为吸收液,加人2滴混合指示剂(4.14),蒸装置的冷凝管末端要浸人装有吸收液的锥形瓶内,然 后向消煮管中加人50ml氢氧化钠浒液(4.10)进行蒸僧,至流出液pH值为中性
蒸僧时间以吸收液 体积达到约100mL时为宜
降下锥形瓶,用水冲洗冷凝管末端,洗液均需流人锥形瓶内
7.2.2.3采用全自动凯氏定氮仪时,按仪器操作说明书进行测定
7.2.3滴定 用o.1mol/L盐酸标准滴定溶液(4.11)滴定吸收液,溶液由蓝绿色变成灰红色为终点
7.3蒸步骤查验 精确称取0.2只硫酸铵(精确至0.0001g),代替试样,按7.1或7.2步骤进行操作,测得硫酸铵含氮 量应为(21.19士0.2)%,否则应检查加碱,蒸馏和滴定各步骤是否正确
7.4空白测定 精确称取0.5迟蔗糖(精确至0.0001g).代替试样,按7.1或7.2进行空白测定,消耗0.1nmol/L盐 酸标准滴定溶液的体积不得超过0.2mL.,消耗0.02mol/几盐酸标准滴定溶液体积不得超过0.3mL
试验数据处理 8 试样中粗蛋白质含量以质量分数w计,数值以质量分数(%)表示,按公式(1)计算: 4 (V一V)×c× ×6.25 O0 ×100 Z一 m× 式中: V -滴定试样所消耗盐酸标准滴定溶液的体积,单位为毫升(mL); V 滴定空白所消耗盐酸标准滴定溶液的体积,单位为毫升(mL); 盐酸标准滴定溶液的浓度,单位为摩尔每升(mol/L);
GB/T6432一2018 试样质量,单位为克(g); 一试样消煮液总体积,单位为毫升(mL); ！ 蒸僧用消煮液体积,单位为毫升(mL); 14 氮的摩尔质量,单位为克每摩尔(g/mol) 6.25 氮换算成粗蛋白的平均系数
每个试样取两个平行样进行测定,以其算术平均值为测定结果,计算结果表示至小数点后两位
精密度 在重复性条件下,两次独立测定结果与其算术平均值的绝对差值与该平均值的比值应符合以下 要求 粗蛋白质含量大于25%时,不超过1%; 粗蛋白质含量在10%25%时,不超过2%; 粗蛋白质含量小于10%时,不超过3%
饲料中粗蛋白的测定凯氏定氮法GB/T6432-2018
饲料是农业生产中不可缺少的一部分，其中粗蛋白是一项重要指标。因此，准确地测定饲料中粗蛋白的含量对于饲养行业来说非常重要。
粗蛋白是指在酸性或中性条件下水解得到的氨基酸和小肽所含的氮的总量。因为氨基酸和小肽都含有氮，所以只需要测定氮的含量就可以计算出粗蛋白的含量。
凯氏定氮法是一种经典的测定饲料中粗蛋白含量的方法，其原理是将样品中的氮转化为氨，并用酸量度生成的氨的数量。它具有操作简便、准确度高等优点，因此在GB/T6432-2018标准中被指定为测定饲料中粗蛋白的方法之一。
下面是凯氏定氮法的具体操作步骤：
- 取适量待测样品，称重。
- 加入适量氢氧化钠（NaOH），使其碱化。
- 加入适量硫酸钾（K2SO4）和氯化钾（KCl），用于催化反应。
- 加入适量含有铜的草酸溶液，作为还原剂。
- 加入适量蒸馏水，使其达到一定的容积。
- 将混合液煮沸，在沸腾状态下持续加热并搅拌10-15分钟，使样品中的氮转化为氨，并在这个过程中去除样品中的一些干扰物质。
- 冷却至室温，并滴加酸性亚硫酸钠（NaHSO3）溶液中和剩余的草酸。
- 加入适量甲基红和甲基橙指示剂，用0.1mol/L硫酸滴定至溶液颜色由红变黄为止。
通过上述步骤，样品中的氮被转化为氨，最终反应生成硝酸铵（NH4NO3），这个过程中消耗了一定量的硫酸。根据硫酸的消耗量，可以计算出样品中氮的含量，进而计算得到样品中粗蛋白的含量。
总之，凯氏定氮法是测定饲料中粗蛋白的一种重要方法，其操作简便、准确度高，是饲养行业广泛采用的方法之一。
饲料中粗蛋白的测定凯氏定氮法的相关资料
- 饲料中蜡样芽孢杆菌的检测GB/T26427-2010
- 饲料中产气荚膜梭菌的检测GB/T26425-2010
- 畜禽饲料有效性与安全性评价全收粪法
- 畜禽饲料有效性与安全性评价强饲法
- 饲用微生物制剂中枯草芽孢杆菌的检测GB/T26428-2010详解
- 粮油检验中粗蛋白的测定——杜马斯燃烧法GB/T31578-2015
- 饲料中粗蛋白的测定凯氏定氮法GB/T6432-2018
- 橡胶全硫含量的测定第1部分：氧瓶燃烧法GB/T4497.1-2010
- 气相色谱-质谱法测定海水中16种多环芳烃的方法（GB/T26411-2010）
- 原铝生产用煅后石油焦检测方法第5部分：残留氢含量的测定GB/T26310.5-2010
- 原铝生产用煅后石油焦检测方法第4部分：油含量的测定溶剂萃取法GB/T26310.4-2010
- 加热法测定煅后石油焦表观油含量
- 塑料酚醛树脂六次甲基四胺含量的测定凯氏定氮法、高氯酸法和盐酸法GB/T33317-2016
- 饲料中粗蛋白的测定凯氏定氮法GB/T6432-2018
- 饲料中粗蛋白的测定凯氏定氮法GB/T6432-2018
