化妆品中限用防腐剂二甲基噁唑烷、7-乙基双环噁唑烷和5-溴-5-硝基-1,3-二噁烷的测定

化妆品中限用防腐剂二甲基噁唑烷、7-乙基双环噁唑烷和5-溴-5-硝基-1,3-二噁烷的测定

国家标准 GB/T39993一2021 化妆品中限用防腐剂二甲基嗯陛炕、 7-乙基双环嗯陛完和5-溴-5-硝基- 1,3-二嘿炕的测定 Determinatonofpermittelpreservathvesdimethyloxazolidine 7-ethylbicyclo0xazolidineand5-brom0-5-nitr0-1,3-dio%aneincosmetics 2021-04-30发布 2021-11-01实施 国家市场监督管理总局 发布 国家标涯花警理委员会国家标准
GB/39993一2021 化妆品中限用防腐剂二甲基嗯哗炕 7-乙基双环嗯炕和5-溴-5-硝基- 1,3-二嗯的测定 警示使用本标准的人员应有正规实验室工作的实践经验 本标准并未指出所有可能的安全问 题 使用者有责任采取适当的安全和健康措施,并保证符合国家有关规定的条件 范围 本标准规定了化妆品中二甲基嗯陛熔7乙基双环嗯陛婉和了澳5硝基-1,3-二嗯烧的气相色谐 质谱联用法和高效液相色谱法的原理,试剂或材料、仪器设备、试验步骤、结果计算,回收率和精密度、允 许差等内容 本标准适用于水剂类、水包油类和油包水类化妆品中二甲基嗯陛烧、7-乙基双环嗯陛婉和5-嗅-5- 暗基1,3二嗯烧的测定 其中,第一法适用于水剂类,水包油类和油包水类化妆品中7-乙基双环腰啤 烧和5-祺-5-硝基-1,3-二嗯婉的测定,以及油包水膏霜类化妆品中二甲基嗯陛婉的测定;第二法适用于 水剂类、水包油类和油包水类化妆品中二甲基嗯幽婉的测定 本标准的方法检出限和定量限:第一法的方法检出限均为15.0mg/kg,定量限均为50.0mg/kg;第 二法的方法检出限为15.0mg/kg,定量限为50,.0mg/kg 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件 凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3 第一法气相色谱-质谱联用法 3.1原理 试样中的待测物经四氢吠喃提取,用气相色谱-质谱联用仪测定;采用选择离子监测(SIM)模式扫 描,以保留时间和特征离子的丰度比定性,外标法定量 3.2试剂或材料 3.2.1四氢吠喃:分析纯 3.2.2丙酮;色谱纯 3.2.3无水硫酸钠:分析纯,于650C灼烧4h,储存于密闭干燥器中 3.2.4标准物质;二甲基嗯哗烧、7-乙基双环嗯哗炕和5-澳-5-硝基-l,3-二嗯婉标准物质的英文名称,国 际化妆品原料名称(INcI名称)化学文摘登记号(CAs号),分子式、相对分子质量及化学结构式参见 附录A中表A.1,纯度均不应小于95% 3.2.5混合标准工作溶液;分别准确称取适量标准物质(3.2.4)(精确至0.0001g),用丙酮(3.2.2)配制 成质量浓度为1000mg/儿的单标标准贮备液(于4C避光保存,宜保存3个月) 取相应的空白样品
GB/T39993一202 按照3.4.1进行处理,得到基质溶液 准确移取适量各单标标准贮备液,用基质溶液逐级稀释成质量浓 度为2.50mg/1,5.00mg/L、10.0mg/L,20.0mg/L,50.0mg/L,.100mg/L的系列混合标准工作溶液 宜现配现用 3.2.6滤膜;聚四氟乙烯滤膜,孔径0.224m 3.3仪器设备 气相色谱-质谱仪;配有电子轰击源(E. 3.3.1 3.3.2分析天平;分度值为0.001g和0.000lg 3.3.3超声波清洗仪:最大工作频率不低于40kIHz 3.3.4涡旋振荡器:最高转速不低于3000r/min. 3.3.5离心机:最高转速不低于4000r/ r/min 3.4试验步骤 3.4.1试样处理 称取试样0.5g(精确至0.001g)于50mL.具塞离心管中,准确加人10.0mL四氢吠喃3.2.1),加 人0.5g无水硫酸钠(3.2.3),涡旋混匀,加盖后超声提取10min,冷却后4000r/min离心3min,取上清 液过0.22m滤膜后得到试样溶液A,待测定 3.4.2测定条件 气相色谱-质谱参考工作条件如下 色谱柱:5%苯基-95%甲基聚硅氧烧石英毛细管色谱柱(30m×250m×0.25m),或相 a 当者 进样口温度;220C; b 载气:缸气,恒流模式,流速1.0mL/min; c 升温程序;初始温度60,保持6min,以10/min升温至200,再以15c/nmin升温至 d 280C,保持5min:; 进样方式:分流进样,分流比为5:1; e f 进样量:l.0AL; 传输线温度:280C; g h 电离方式;电子轰击电离(EED); 电离能量:70eV; 1 离子源温度:230C; s 扫描方式;选择离子扫描,溶剂延迟3min; 待测化合物的保留时间、特征选择离子及丰度比见表1 表13种待测化合物的保留时间、特征选择离子及丰度比 化合物 保留时间/" a碎片离子(丰度比) min 7-乙基双环嗯陛烧 1,29 55:83:113":14340:50:100:30 5-嗅-5-硝基-1,3-二嗯炕 13.51 85:107:135:137(29:50:100:95 二甲基嗯哗烧 3.37 58;70;71"864638:100;62) 定量离子
GB/39993一2021 3.4.3标准工作曲线绘制 按测定条件(3.4.2)对系列混合标准工作溶液(3.2.5)进行测定,以各待测物定量离子色谱峰的峰面 积为纵坐标,对应的标准溶液浓度为横坐标作图,绘制标准工作曲线 3种防腐剂标准物质的气相色谱-质谱总离子流图参见附录B中图B.1 3.4.4定性分析 在测定条件(3.4.2)下,试样溶液A和标准工作溶液的特征选择离子色谱峰在相同保留时间处 士0.5%出现，且试样溶液A的特征离子相对离子丰度与浓度相当的标准工作液的特征离子相对离 子丰度的相对偏差不超过表2规定的范围,则可判定试样中存在相关目标化合物 表2定性确证时特征离子相对离子丰度和最大允许偏差 相对离子丰度人 /% 人10 k50 50>k>20 20>k>10 土15 允许的最大偏差/% 士10 士20 士50 3.4.5定量分析 本标准采用外标校准曲线法定量测定 以各待测物定量离子色谱峰的峰面积为纵坐标,对应的标 准溶液浓度为横坐标,绘制标准曲线 以试样中待测化合物的定量离子色谱峰的峰面积与标准曲线比 较定量 试样溶液A中待测化合物的响应值均应在标准曲线的线性范围之内,超出线性范围的试样溶液A 可适当稀释后进行测定 3.4.6空白试验 除不称取试样外,均按3.4.1一3.4.2进行测定 3.5结果计算 试样中待测化合物的含量按式(1)进行计算; 000 p一p,×V×1 7c m×1000 式中 Te" -试样中待测化合物的含量,单位为毫克每千克(mg/kg); -试样溶液A(3.4.1)中待测化合物峰面积对应的质量浓度,单位为毫克每升(mg/L); 空白试样(3.4.6)中待测化合物的质量浓度,单位为毫克每升(mg/L). p 四氢吠喃的体积,单位为毫升(mL); -试样质量,单位为克(g). mn 计算结果保留三位有效数字 3.6回收率和精密度 在添加浓度为50.0mg/kg一500mg/kg范围内,回收率为80%110% 相对标准偏差小 于10% 3.7允许差 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于这两个测定值的算术平均值的10%
GB/T39993一2021 第二法高效液相色谱法 4.1原理 试样中的二甲基嗯陛炕经50%体积分数)乙晴溶液提取,提取液经正己炕净化、离心、9-坊甲氧拨 酰氯衍生后,用高效液相色谱仪测定 以保留时间和光谱图定性,外标法定量 4.2试剂和材料 除另有说明外,所用试剂均为分析纯 4.2.1水,GB/T6682,一级 4.2.2乙睛:色谱纯 4.2.3正己婉:色谱纯 4.2.4四碉酸钠(NaB,O,l0H.O):优级纯 4.2.59-劳甲氧酰氯(FMOC-CI);纯度不小于99% 4.2.650%体积分数)乙睛溶液;准确量取50mlL乙晴(4.2.2)和50ml水,混匀后备用 4.2.7乙睛饱和的正己熔:分别量取20ml.乙睛(4.2.2)和50ml.正己婉(4.2.3)至100ml具塞锥形瓶 中,混匀静置,上层为乙晴饱和的正己炕 42.8缓冲溶液;准确称取5.0g四棚酸钠(4.2.4),溶于90mL50C水中,移人100mL容量瓶,用水定 容至刻度 4.2.99-坊甲氧酰氯溶液(10.0g/L);准确称取9-劳甲氧炭酰氯(4.2.5)0.50g,溶于20mlL乙脖 4.2.2中,移人50ml容量瓶,用乙晴(4.2.2)定容至刻度 4.2.10标准曲线工作液;准确称取二甲基嗯陛烧标准品(3.2.4)25.0mg(精确至0.1mg),置于50ml 棕色容量瓶中,用乙睛(4.2.2)溶解、定容,得到质量浓度为500mg/L的标准储备液(于4C避光保存 宜保存3个月) 准确移取适量的标准储备液,用50%乙腊溶液(4.2.6)逐级稀释成质量浓度为 2.50 /L、50.0 nmg/儿L、5.00mg/L,10.0mg/儿L20.0 mg/L,100mg/L的标准工作溶液(宜现配现用). mg 4.2.11滤膜:聚四氟乙烯滤膜,孔径0.22m. 4.3仪器设备 4.3.1高效液相色谱仪;配有二极管阵列检测器 4.3.2分析天平:分度值为0.001g和0.0001g 4.3.3涡旋振荡器;最高转速不低于3000r r/min 4.3.4超声波清洗仪;最大工作频率不低于40kHz 4.3.5高速离心机;转速不低于4000r r/min 4.4试验步骤 4.4.1试样处理 称取试样0.5g(精确至0.001g),置于10ml具塞比色管中,加人8ml50%乙晴溶液(4.2.6),涡 旋振荡1min,超声提取10min,冷却至室温,使用50%乙睛溶液(4.2.6)定容至10mL,混匀,取5ml min,4000" 提取液至离心管中,加人3mL乙睛饱和的正己炕(4.2.7),涡旋振荡1" r!/min离心2min,准 确移取下层清液1.0mL,加人0.2mlL缓冲溶液(4.2.8),涡旋混合均匀,然后加人0.2ml.9-坊甲氧偻酰 氯溶液(4.2.9),室温反应10min,衍生液经滤膜过滤后得到试样溶液B,供高效液相色谱仪测定 注，若配料表中标识的原料含有复基或伸胶基,宜适当增加9-甲氧腺肤氧溶液用量至05m.
GB/39993一2021 4.4.2测定条件 高效液相色谱参考工作条件如下 色谱柱:C柱,1.8m,50mm×2.1mm(内径)或C柱,5.0m,150mm×4.6mm(内径),或 a 相当者; 流动相;乙晴(4.2.2)和水,梯度洗脱条件见表3 b 流速:0.4mL/min: c d 柱温;30C; 波长;265nm; ee 进样量;2AL fD 8 后运行时间:3min 表3高效液相色谱梯度洗脱条件 时间/ 乙睛/% min 水/% 0.0 20 80 6.0 60 40 9.9 80 20 10.0 20 80 4.4.3标准工作曲线绘制 准确移取各标准工作溶液(4.2.10)1.0mL,加人0.2ml缓冲溶液(4.2.8),涡旋混合均匀,然后加人 0.2ml9-坊甲氧朕酰氯溶液(4.2.9),室温反应10min,衍生液经滤膜过滤后按高效液相色谱参考工作 条件(4.4.2)进行测定,以色谐峰的峰面积为纵坐标,与其对应的溶液浓度为横坐标作图,绘制标准工作 曲线 二甲基嗯陛婉标准物质衍生物的液相色谱图参见附录C中图C.1,二甲基嗯陛婉标准物质衍生物 的光谱图参见图C.2 4.4.4试样测定 按高效液相色谱参考工作条件(4.4.2)测定试样溶液B(4.4.1),如果检出的色谐峰的保留时间与标 准物质的一致,并且在扣除背景后的样品色谱图中,该物质的光谱图与标准物质的一致,则可初步确定 样品为阳性样品,记录色谱峰的峰面积以外标法定量 试样溶液B中被测物的响应值应在标准工作 曲线的线性范围之内 超出线性范围的试样溶液B,应将试样处理中未衍生的下层清液用50%乙晴溶 液(4.2.6)适当稀释并重新衍生后进行测定 4.4.5空白试验 除不称取试样外,均按4.4.1一4.4.2进行测定 4.5结果计算 试样中待测化合物的含量按式(2)进行计算 二A)xVx1oo0 p一 7= 川×1000
GB/T39993一2021 式中 Z 试样中被测组分的含量,单位为毫克每千克mg/kg); /L); 从标准曲线得到的试样溶液(4.4.1)中被测组分的质量浓度,单位为毫克每升mg/ p 从标准曲线得到的空白试样(4.4.5)中被测组分的质量浓度,单位为毫克每升mg/L) V 试样溶液定容体积,单位为毫升ml); 试样质量,单位为克g). n 结果保留三位有效数字 4.6回收率和精密度 在添加浓度为50.0mg/kg500mg/kg范围内,回收率为80%110%,相对标准偏差小于10% 4.7允许差 在重复性条件下获得的两次独立浏定结果的绝对差值不大于这两个测定值的算术平均值的10%.
GB/39993一2021 录 附 A 资料性附录 3种限用防腐剂标准物质的信息 3种限用防腐剂的中文名称,英文名称,INCI名称(国际化妆品原料名称),CAS号分子式,相对分 子质量及化学结构式见表A.1 表A.13种限用防腐剂标准物质的信息 相对分 CAs号 化学结构式 中文名称 英文名称 NCI名称 分子式 子质量 4,4-DimethyF1. Dimethy HN 二甲基噼哗婉 51200-87-4C;HNO101.15 3-oxazolidine oxazolidine 7-乙基双环 ;Bty3 ,7-dioxa-1 7-Ethylbicyclooxaz 7747-35-5cHNO. 143.19 嗯陛炕 azabieyclo[3.3.0]octane olidine 5-澳-5-硝 5-Bromo5-nitro-l 5-Bromo-5-nitro-l 30007-47-7cHBrNO.212.00 基-1,3-二嗯烧 3-dioxane 3dioxane
GB/T39993一2021 录 附 B 资料性附录) 3种防腐剂标准物质的气相色谱-质谱总离子流图 3种限用防腐剂标准物质的气相色谱-质谱总离子流图见图B.1 13.51 1.6×10 ll.28 1.2×10 3.34 8.0×10 4.0×101 0.0 1G 15 30 220 时间/min 说明 二甲基嗯陛婉; 7-乙基双环嗯哗烧 5-澳-5-硝基-l,3-二嗯烧 图B.13种防腐剂标准物质的气相色谱-质谱总离子流图
GB/39993一2021 附录 C 资料性附录 二甲基嗯畦娆标准物质衍生物的液相色谱图及光谱图 二甲基嗯陛炕标准物质衍生物的液相色谐图见图C.1,二甲基嗯哗熔标准物质衍生物的光谱图见 图c.2 40 9荻甲氧淡酰氧 30 5.32 二甲基嗯啤烧 29 10 时间/min 图c.1二甲基嗯陛浣标准物质衍生物的液相色谱图(入=265 nm 20 16 14 12 10 2 2o 3 56o 260 280 320 340 380 400 波长/nm 二甲基嗯陛婉标准物质衍生物的光谱图 图C.2