植物代谢产物大豆凝集素测定酶联免疫吸附法

植物代谢产物大豆凝集素测定酶联免疫吸附法

国家标准 GB/T40220一2021 植物代谢产物大豆凝集素测定 酶联免疫吸附法 Determinationofsoybeanagglutininofplantmetabolites- Enzyme-linkedimmumosorhentassay 2021-05-21发布 2021-12-01实施 国家市场监督管理总局 发布 国家标涯花管理委员会国家标准
GB/T40220一2021 前 言 本文件按照GB/T1.1一2020<标准化工作导则第1部分;标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草 请注意本文件的某些内容可能涉及专利 本文件的发布机构不承担识别专利的责任 本文件由全国生化检测标准化技术委员会(SAC/TC387)提出并归口 本文件起草单位;江南大学、绿城农科检测技术有限公司、北京工商大学、北京萨姆伯科技有限 公司 本文件主要起草人:胥传来、王川丕、王珍、马爱进、王忠兴、郝帅、曾露、马伟
GB/T40220一2021 植物代谢产物大豆凝集素测定 酶联免疫吸附法 范围 本文件规定了植物代谢产物大豆凝集素的酶联免疫吸附测定方法 本文件适用于大豆及其制品中植物代谢产物大豆凝集素的测定 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款 其中,注日期的引用文 件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于 本文件 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义 原理 样品经处理后,样液中的大豆凝集索与微孔板中包被的大豆凝集素抗体(捕获抗体)结合,洗板除去 未结合的其他成分,再与大豆凝集素酶标抗体结合,加酶标底物显色,用酶标仪在450nm波长下测定 吸光度值,计算大豆凝集素含量 S 试剂和材料 除非另有规定,本方法所用化学试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的二级水 5.1大豆凝集素检测试剂盒;见附录A 5.2大豆凝集素;纯度>95%.CAs号为68513-95-1 5.3应按照试剂盒说明书配制所需溶液 6 仪器设备 6.1小型粉碎机 6.2分样筛;孔径0.9mm. 6.3匀浆机 6.4涡旋混合器 6.5电子天平;感量0.01g 6.6具塞离心管:15ml
GB/T40220一202 6.7 微孔板酶标仪;带450nm滤光片 6.8试剂盒所要求的仪器 样品的制备与保存 7.1固态样品制备 称取100g样品,用小型粉碎机进行粉碎,粉碎后的样本过孔径0.9mm分样筛 装人清洁密封容 器,并加以标识,待测 7.2半固态样品制备 称取100只样品,用匀浆机充分混匀后,装人清洁密封容器,加以标识,待测 7.3液态样品制备 称取100其样品,用涡旋混合器充分混匀后,装人清洁密封容器,并加以标识,待测 8 试验步骤 8.1样品前处理 称取1.00g制备的样品,置于15ml具塞离心管中,加人试剂盒所要求提取液.按照试剂盒说明书 所述方法进行稀释和检测 8.2测定 按照酶联免疫试剂盒所述操作步骤对待测试样(液)进行定量检测 8.3平行试验 按以上步骤,对同一标准溶液、同一样品溶液均应进行平行试验测定 8.4空白试验 除不称取试样外,均按上述步骤进行 8.5阳性质控 根据待测样本中大豆凝集素的含量,选择一个合适的质控标准,以确定试验过程的操作准确性 试验数据处理 9 g.1酶联免疫试剂盒定量检测的标准工作曲线绘制 按照试剂盒说明书提供的计算方法或者软件,根据标准品质量浓度与吸光度变化关系绘制标准工 作曲线 9.2待测液质量浓度计算 按照试剂盒说明书提供的计算方法以及计算机软件,将待测液吸光度代人9.1所获得标准工作曲 线,计算待测液质量浓度(p)
GB/T40220一2021 g.3结果计算 样品中大豆凝集素的含量按式(1)计算 px×a×1000 X-" ×1000 式中 X -样品中大豆凝集素的含量,单位为微克每千克(4g/kg); 从标准工作曲线上得到的样品中大豆凝集素质量浓度,单位为纳克每毫升(ng/ml). -样本提取液体积,单位为毫升(mL); 在前处理过程中的稀释倍数; n 试样的称样量,单位为克(g). 计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示,保留3位有效数字 10精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20% 11 准确度 本方法供醇联免疫试剂盒测试的大豆凝集素溶液加标浓度为100ng/mL时,平均回收率为76.2%一 120.9%;当供酶联免疫试剂盒测试的大豆凝集素溶液加标浓度为1000ng/mL时,平均回收率为 82.7%~111.9%;当供酶联免疫试剂盒测试的大豆凝集素溶液加标浓度为5000ng/mL时,平均回收 率为89.4%107.6% 其他 12 当称取大豆、豆粕等固态和半固态样本1.00g时,大豆凝集素的检出限为3004g/kg,定量限为 5004g/kg;当称取豆奶、豆浆等液态样本1.00只时,大豆凝集素的检出限为304g/kg,定量限 为504g/kg
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GB/T40220-2021植物代谢产物大豆凝集素测定酶联免疫吸附法

背景介绍

大豆凝集素是大豆中一种特殊的蛋白质，它具有许多生物学功能，如抗菌、抗病毒、促进细胞凋亡等。因此，大豆凝集素被广泛应用于食品、医药、化妆品等领域。但同时，大豆凝集素也可能对人体健康造成一定的危害。

为了保障消费者的权益，确保大豆及其制品的安全性，需要对大豆凝集素进行检测。随着科技的发展，酶联免疫吸附法已成为一种常用的大豆凝集素检测方法。

GB/T40220-2021标准介绍

GB/T40220-2021是国家质量监督检验检疫总局、国家标准化管理委员会发布的关于大豆凝集素测定的标准。该标准规定了通过酶联免疫吸附法对大豆凝集素进行测定的方法和要求。

具体来说，该标准对样品的准备、试剂的配制、反应条件的设定等方面都做出了详细的规定。此外，该标准还对结果的判定与分析做了具体说明。

值得注意的是，该标准不仅适用于大豆及其制品，还适用于其他植物及其制品中大豆凝集素的测定。

酶联免疫吸附法的优势

相比其他大豆凝集素检测方法，酶联免疫吸附法具有以下优势：

1. 快速高效：酶联免疫吸附法具有高灵敏度和高特异性，可以在较短时间内完成大豆凝集素的检测。
2. 简单易操作：该方法不需要复杂的仪器设备，只需要一些基本的实验室器材即可。
3. 成本低廉：相比其他检测方法，酶联免疫吸附法的试剂成本较低。

结论

GB/T40220-2021标准规定了通过酶联免疫吸附法对大豆凝集素进行测定的方法和要求，是目前常用的大豆凝集素检测方法之一。酶联免疫吸附法具有快速、高效、简单易操作和成本低廉等优势，适用于大豆及其制品以及其他植物及其制品中大豆凝集素的测定。因此，对于相关专业人士来说，掌握GB/T40220-2021标准及酶联免疫吸附法的相关知识是非常重要的。

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