饲料毒理学评价亚急性毒性试验

饲料毒理学评价亚急性毒性试验

国家标准 GB/T23179一2008 饲料毒理学评价亚急性毒性试验 -Suwhaeutetoxieitlytest Feedltoxieology eValuati0n 2008-12-31发布 2009-05-01实施 国家质量监督检验检疫总局 发布 国家标准化管蹬委员会国家标准
GB/T23179一2008 前 言 本标准由农业部提出 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会归口 本标准起草单位;兽医药品监察所、农业大学 本标准主要起草人:黄齐颐、沈建忠、肖希龙
GB/T23179一2008 饲料毒理学评价亚急性毒性试验 范围 本标准规定了饲料毒理学评价亚急性毒性试验的术语和定义、试验方法、观察指标,实验动物器官 检查、数据处理及试验报告等要求 本标准适用于饲料添加剂对动物的亚急性毒性评价 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款 凡是注日期的引用文件,其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本 凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准 GB14922.1实验动物寄生虫学等级及监测 GB14922. 2 实验动物微生物学等级及监测 GB14924.1实验动物配合饲料通用质量标准 GB14924.2实验动物配合饲料卫生标准 GB14924.3实验动物小鼠大鼠配合饲料 GB14924.7实验动物犬配合饲料 GB14925 实验动物环境与设施 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准 受试物testsubstances 试验中被检验的物质,其稳定性试验应已基本完成影响稳定性的因素应作说明,生产工艺已基本 定型,并已制定基本的质量标准 单一成分的产品应标明其纯度;多种成分的应表明各种成分的含量和 载体、稀释剂或赋形剂的品种 3.2 溶媒或赋形剂对照组solventorexecipientcontrolgroup 除受试物外,以同样的途径给予实验动物与试验组同样的溶媒或其他赋形剂,同一环境中饲养 3.3 正常对照组normalcontrogroup 与试验组实验动物在同一环境中饲养,不给予受试物和赋形剂 试验方法 实验动物 用呐齿类和非呐齿类两种动物 啃齿类动物,首选为大鼠,雌雄各半,6周龄8周龄,体重80g一 120g,试验前至少观察1周,试验开始时,动物体重个体差异不得超过平均体重的20% 必要时使用非 啮齿类动物,非啮齿类动物通常可选用毕格犬beagle) 使用清洁级小鼠大鼠和普通级犬均应符合 GB14922.1、GB14922.2的规定 各种实验动物均需注明品系及实验动物生产合格证、供应单位、地 址和邮政编码
GB/T23179一2008 4.2实验动物饲养管理 饲养环境应符合GB14925的规定,并注明动物饲养室的光照和通风条件,每天记录饲养室的温 度,湿度 大鼠笼养每笼不超过5只 饲料应符合GB14924.1,GB14924.2,GB14924.3,GB14924.7 的规定 给予受试物的周期 应用受试物1d7d,实验动物接受受试物的周期为30d;应用受试物8d或8d以上的,实验动物 接受受试物的周期为90d 4.4剂量分组 试验一般设5个剂量组,即高、中、低剂量组,溶媒或赋形剂对照组以及正常对照组 剂量以 mg (mlIU)/kg体重表示 每组啃齿类动物不少于24只,非啮齿类动物不少于12只 雕雄各半,特 殊情况应另行说明,分笼饲养,分为6个重复 分组后对每个实验动物编号 如果计划在试验期间需要 定期剖检部分实验动物,则应相应增加每组实验动物数 4.5剂量要求 高剂量一般应使实验动物产生明显的或严重的毒性反应,或个别实验动物死亡;低剂量应高于预计 实际应用时的每日用量且实验动物不出现可观察到的毒性反应 高剂量和低剂量之间设中剂量 剂量 范围通常为ID的1/10" -1/100,在此基础上做预试验确定高、中,低剂量组 4.6给予受试物的途径 给予受试物途径与应用途径相同,口服给予受试物试验时可采用灌胃给予受试物,也可将受试物混 人饲料或饮水中口服,但应保证受试物分布均匀,在饲料或饮水中稳定,摄人受试物剂量准确 恢复期观察 最后一次给予受试物后24h.每组断颈处死剖检1/2一2/3的实验动物检测各项指标,剩余实验动 物继续观察2周4周后剖检,观察毒性反应的可逆程度和可能出现的迟发性毒性反应 在此期间,除 不给予受试物外,其他观察内容与给予受试物期间相同 观察指标 5.1一般观察 每天观察外观体征、行为活动和粪便性状及颜色;皮毛贴身或稀疏竖散、神态萎靡、蜷缩不动、过度 兴奋、躁动惊跳、肌肉麻痹或震颤、步态异常等 群养时应将出现中毒反应的动物取出单笼饲养,发现死 亡或濒死实验动物应及时尸检，一般在1h之内进行 5.2体重 应设定能掌握体重变化的测定次数,给予受试物前一周测定一次体重,实验期间至少每周测定一次 体重 测定体重时间应前后相同，一般在给予受试物前、且在断饲不断水隔夜条件下进行 如每日灌胃 给予受试物时,应每天测定体重,并按新的体重给予受试物 55 3 摄食量 测定体重时应同时测定摄食量,以每个重复为单位,计算摄食效率[增加的体重(g)/摄食量(g)] 5 血液学指标 各组实验动物在开始给予受试物前、给予受试物期间、停止给予受试物时和恢复期结束时检测红细 胞和网织红细胞计数、血红蛋白、白细胞总数及分类、血小板、凝血时间等 5 5 血液生化指标 各组实验动物在开始给予受试物前、给予受试物期间、停止给予受试物时和恢复期结束时,检测天 冬氨酸氨基转氨酶(AST或SG0T),丙氨酸氨基转氨酶(AL.T或sGBT),碱性磷酸酶(ALP或AKP 尿素氮(BUN)、总蛋白(TP),白蛋白(AIb),血糖(GLU)、总胆红素TBill),肌F(Cr),总胆固醇(TeH) 等血液生化指标
GB/T23179一2008 实验动物器官检查 系统尸检 应全面细致地肉眼观察各器官,为组织学检查提供依据 6.2脏器系数 脏器重量与实验动物体重的比值 称量脏器前用滤纸吸干表面水分 受检的脏器为:心、肝、脾、 肺、肾,必要时检查肾上腺、甲状腺、睾丸、子宫、脑和前列腺 6.3组织学检查 对照组和高剂量组的动物及尸检异常的动物要详细检查,其他剂量组的实验动物在高剂量组检查 有异常时检查 受检的脏器为:心,肝、脾、肺、肾,必要时检查肾上腺、胰腺、胃、十二指肠、回肠、结肠、垂 体、前列腺、脊髓、胸骨(骨和骨髓)淋巴结、膀胧、甲状腺、胸腺、睾丸(含附睾)、子宫(含卵巢、脑和视 神经 数据处理 详细记录观察到的结果,无论是计数数据还是计量数据,均应以统计学方法给予评价,进行差异性 检验 试验报告 8 试验摘要 试验摘要应简要介绍试验的目的;试验方法,如试验周期,实验动物、剂量分组、给药途径、观察项目 等;试验获得的结果,如受试物对实验动物的影响;试验获得的结论 试验报告正文 试验报告正文应有引言、材料与方法、试验结果、相应的统计图表、结果分析及试验结论组成 试验时间及资料保存 试验报告应标明试验开始和结束的时间及全部试验资料的保存地点 试验单位及人员 试验报告应标明承担试验的单位名称,试验负责人,主要执行人员的姓名,职称;进行病理学检查、 血液生化指标测定,血液学指标测定等负责人的姓名、职称